禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)elisa試劑盒

簡(jiǎn)要描述：禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)elisa試劑盒采用一步間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），與CUT OFF值相比較，從而判定標(biāo)本中禽腦脊髓炎病毒抗體（AEV-Ab）的存在與否

更新日期：2024-11-17
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產(chǎn)品介紹

品牌	軒澤康	規(guī)格	96T,48T
供貨周期	現(xiàn)貨	主要用途	僅供科研
應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥	保質(zhì)期	6個(gè)月
保存條件	2-8℃	檢測(cè)方法	一步間接法
實(shí)驗(yàn)儀器	酶標(biāo)儀	樣本類型	血清、血漿、細(xì)胞上清液等
特色服務(wù)	免費(fèi)代測(cè)

禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備：

1）確定試劑盒在有效期內(nèi)

2）仔細(xì)閱讀說明書，按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）

3）提前準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需的設(shè)備（如離心機(jī)、37℃恒溫箱、高精度加樣器及槍頭、酶標(biāo)儀等）

4）標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者注意低溫保存。根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量

5）按說明書將所有試劑平衡至室溫，配制所需試劑。嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)步驟。

檢測(cè)原理：試劑盒采用一步間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被腦脊髓炎病毒（AEV）抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），與CUT OFF值相比較，從而判定標(biāo)本中禽腦脊髓炎病毒抗體（AEV-Ab）的存在與否。

樣品收集、處理及保存：

1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。

3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。

4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。

7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

8. 保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-80 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)elisa試劑盒結(jié)果判斷

1. 試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00；

陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15。

2. 臨界值（Cut off）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15

3. 陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性

4. 陽(yáng)性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off），樣品為陽(yáng)性

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